��ࡱ� > �� z | ���� y �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 9 �R� R* bjbj���� �� �� �� �� �� �� l 4 : � � � h & $ J , : L j � � � � � � � � �K �K �K �K �K �K �K $ �M �O P �K - � � � � � �K j5 � � �K j5 j5 j5 � � � � �K j5 � �K j5 B j5 �9 � KB � �C � v ��k��: � � *. " C �C � �K 0 L C � �O L4 �O �C j5 : : � �S2u�� Nz� }E L I S A ՋBR�v ( �_�VI B L �R E 5 9 2 6 1 ) 1 0�^(u��V dkՋBR�v�S(u�N�N@�n�T?\�m-N�S2u�� Nz� }�vSOY�[ϑ�hKm0 2 04N�^aIN ?Q6�Z���{|�o }�� Nz� }0�S2u�� Nz� }�TY�]��;N��1u�� Nz�Ӛ(�0�Na^y�~�|�~�T'Y��Nu0�[�N�QNNq_�T@b g�v�~�~�v^NvQ�[�o }�T^y�~�|�~ Nw��SNT�yutǏz�v���0(W��Y�u�u-N�?Q6�Z����o }�SvQ�N"��Nir�S�� Nz� }�T�S2u�S�� Nz� }�vR�lϑ��O�X�R��V�ُ�N�o }�S(u�N�u�u�vʋ�e0@b�N�ُ�N�o }�v�hKm�[�N�u�u�vʋ�e�S^y�~�|�~��$v�u�u�vwQ g͑��aIN0�[;N��(u�N�U��~ހ$v�vʋ�e�S_6q_N(u�Nb^y�~�~ހ$v�T^y�~���~ހ$v�vʋ�e0�V:N(W�[�� N _�Y�e g�c�Sek���(u7b�SO(uT�y�RirPg�eۏL��[��0@b g�Rir�v?Q6�Z����vSf[�~�g�vT��VdkdkՋBR�v�S(u�NKm'Y �0\ �bvQ�[�Rir0 3 0�[���St dk�V�vE L I S A ՋBR�v)R(u�v9Y�_�l�St0�_T[-NS���N��bTQ�bSO0KNT�ReQ�v�m`�bSO�S�N�~T0R�b�SRP[�v N*N�b�S�Q�[| N���b�SRP[�S(W)n��g�Q�~T0R�V�v�bSO N07h�T-N�v�b�SNv�h�N�b Nw�(W�_T[�Q)n���dkv�h�N�b�S�~T0R�b�SRP[ N�v�S N NTh�MO N0�ReQ�^ir�mT��n�m@b>f:y�v��r�:_�^N7h�T-N�b�S�vϑbck�k07h�T�v�~�g�S�v�c�Nh�Q�f�~ N���S0 4 0.�X[N3z�['` ՋBR�v�TЏ���s�X�T�PX[�s�X)n�^:N2 - 8 !��MQ�p�nb*Y3��v\07h�T�v�PX[N3z�['`�SՋBR�v�QY\(W�vsQ�z��-N���0 _\�vՋBR�v(W gHeg�Q3z�[�MR�c/f\ՋBR�v(u��P[�[\v^�PX[�N2 - 8 !�v�s�XN0 5 07h�T�vǑƖN�PX[ �la �NSO�Q�v?Q6�Z�(l�T��2u�� Nz� }�vʑ>eO�S0R N�Nߘ�T�To�ir�vq_�T0�Vdk(W7h�TǑƖMR7 2 \�e�Q�u�N�^�ybk g(uNRߘir�To��T��~u }B ��TaU���I���2u�WY�]�M A O �C O M T �b6RBR�؏ gM�@��S{|o�ir0 @�Fm�E D T A � �la @��mǑƖT$N\�e�Q�\@��m7h�T�Qυ�N2 - 8 !�v�s�XN�v�y�_���S@�Fm0 �laY� �z:RǑƖhQ@��v8^ĉ�la�Ny�0�NǑƖ0R@��m7h�T�v�� N;Rw�0R�hKm�e���^�Oc@��m7h�T�vSf[teSO'`0 N��O(uf>f�n@�0Ğ�u�v�T�@�7h�T0�Y�g7h�T�Q�s�mJm�R(W�[��MR�^S_�y�_�Nd��S@b g�v�_�|ir(�0 .�X[ 2 - 8 ! d"- 2 0 ! �MQ�p�nb*Y3��v\��MQ�S Y�Q����Q�Q�r`NЏ��7h�T0 3z�['` 6 h 1 *Ng ?\�m �S�N/f�6q?\�m_N�SO(u2 4 h ?\�m0\�u�N2 4 h �Q�v@b g?\�m��6eƖ0R�v^�mT�N+T1 0 - 1 5 m l 6 N �vH C l 2�P�BR�vՋBR�t-N0 .�X[ d"- 2 0 ! �MQ�p�nb*Y3��v\��MQ�S Y�Q����Q�Q�r`NЏ��7h�T0 3z�['` 6 *Ng 6 0ՋBR�vbR �la�ՋBR�v g��YZP9 6 �NUST[�hKmb4 8 �N�ST[�hKm@b ��vՋBRbR peϑ h�_ bR 1 � 1 2 � 8 M T P S��g��S�b��_T[-NS���N�bTQI g G ���USKQ�� �0 1 � 6 � 2 . 5 m l C A L A - F h�Q�TA - F �sS(u �� Nz� }: 0 ; 1 . 5 ; 1 5 ; 5 0 ; 1 5 0 n g / m l ( 0 ; 8 ; 2 7 ; 8 2 ; 2 7 3 ; 8 1 9 n m o l / L ) �S2u�� N }: 0 ; 5 ; 1 5 ; 5 0 ; 1 5 0 ; 5 0 0 n g / m L ( 0 ; 3 0 ; 8 9 ; 2 9 6 ; 8 8 7 ; 2 9 5 5 n m o l / L ) Y�]��: 0 ; 1 2 ; 3 5 ; 1 1 5 ; 4 5 0 ; 2 2 5 0 n g / m L ( 0 ; 7 8 ; 2 2 8 ; 7 5 0 ; 2 9 3 8 ; 1 4 6 8 8 n m o l / L ) �Q+T[ - ] �� Nz� }�[ - ] �S2u�� Nz� }�[ - ] Y�]��( guir;m'`) , 0 . 1 M �vH C l 1 � 2 � 2 . 5 m l C O N T R O L 1 + 2 (��c�T1 + 2 sS(u, +T: [ - ] �� Nz� }�[ - ] �S2u�� Nz� }�[ - ] Y�]��( wQ guir;m'`) , 0 . 1 M �vH C l , wQSOSm�^�S�SAQ����V����ՋBR�th~{. 1 � 2 5 0 �L E N Z C O N J C O N C v�T�ir Sm)�W�1 0 0 � � �Q+T��x'`�xx�v�h���v�bSO�T r i s �Q�m�H C l �0 . 0 1 % �vN a N 3 2 � E X T R P L A T E �c�Sg��_T[g � �kg2 4 T[�S���N|xx��N�T�Q��0 1 � 6 0 m l E X T R B U F �c�S�Q�m �|�~r��sS(u��Q+T�0 . 0 1 6 % �vN a N 3 2 � 1 . 2 5 m l C O M T L Y O C O M T �Qr^�| �Q+T�?Q6�Z�- 'lMO- 2u�Wl��yv��*s�� ��N a N 3 1 � 2 m l C O M T A D D C O M T �m�RBR �Q+T��N@�Fm�3z�[BR�0 . 0 1 % kx�g^l0 1 � 7 m l A N T I S E R U M D O �S2u�� Nz� }�b@�n +}WpQr��sS(u��Q+T��b�S2u�� Nz� }�bSO�TQ ���Q�m�3z�[BR0 2 � 1 . 2 5 m l C O E N Z v�T� YTir sS(u��Q+T�S - z���- L - ˆ}vx��3z�[BR0 1 � 3 m l E N Z B U F v��Q�m sS(u��Q+T�T r i s �Q�m�H C l �3z�[BR0 1 � 1 7 m l R E L E A S E B U F R e l e a s e �Q�m Ğr��sS(u��Q+T�0 . 1 M �vH C l �c:yBR0 1 � 3 m l A C Y L R E A G p�SՋBR sS(u��Q+T��N2u�W2up����YN��0�la� g�k�ؚ�S�q'`0 1 � 5 0 m l W A S H B U R C O N C m�m�m Sm)�W�1 0 � � �Q+T�T r i s �Q�m�H C l �T)n�0 . 2 % �vN a N 3 1 � 9 � P N P P S U B S P N P P �^irGr �Q+T��[]x�W��xx��P N P P � 1 � 2 7 m l P N P P B U F P N P P �^ir�Q�m sS(u��Q+T��NYN�����4l�0 . 0 5 % �vN a N 3 1 � 1 5 m l P N P P S T O P P N P P �~bk�m sS(u��Q+T�1 M �vN a O H �0 . 2 5 M �vE D T A 3 � F O I L �|'`ё^\g 7 0�[��@b �hVPg�FOՋBR�v N�c�O � �y�mhV�1 0 �1 0 - 1 0 0 �1 0 0 - 1 0 0 0 �L � h�S�Gd�^�2 0 0 - 9 0 0 r p m � �e�m�mThV &^�PhV�v8 �S��y�mhV m�m�t�ꁨRbJSꁨRS��gnm�|�~ v�h�N �S��4lb�S�yP[4l 8T4l�~��S7h8T4Y����ehV 8 0�[��MR�f �la (u�N9 6 �N�N�hKmr�ՋBR�vbR�SRb$N!kۏL�0�NR@b��SO�y:NZP4 8 �N�N�e@b ����vϑ0 8 . 1 7h�T�v zʑ �Y�g7h�T-N�S2u�� Nz� }Sm�^ؚ�N gؚh�Q�T�v�^ cgqNR@b��ۏL� zʑ� 7h�T �_ zʑ zʑ�m Y�l @�Fm �S2u�� Nz� }Sm�^ؚ�N gؚh�Q�T-N�S2u�� Nz� }�vSm�^ �S��4l �c�Sek��MR ?\�m �S2u�� Nz� }Sm�^ؚ�N gؚh�Q�T-N�S2u�� Nz� }�vSm�^ 0 . 1 N �vH C l �c�Sek��MR 8 . 2 7h�T0h�Q�T�T(��c�T�v�c�S��c�Sg�Kb�R�d\OHr � 1 � \h�Q�T0�] zʑ}Y�v(��c�T0�] zʑ}Y�v?\�m7h�TT2 0 �L �T5 0 0 �L @�Fm7h�T�ReQ0R�c�Sg�v�^�v�_T[-N0d�@�Fm7h�TT[Y�(W@b g�v�_T[-N�ReQ5 0 0 �L �S��4l�N�md�SO�y�]+R0 2 � (W�k N�_T[-N�ReQ1 0 0 0 �L �c�S�Q�m 3 � �vg0(Wh�S�Gd�^�6 0 0 - 9 0 0 r p m � N1 8 - 2 5 !�v�s�XN�c�S3 0 m i n 0(W�c�SǏz-N��mSO�vh�b��^�Oxmn�|'`ё^\g�FO�mSO�vϑ N����Ǐ�_T[�v2 / 3 0�mSO/f&T�n�Qv^ NOq_�T�[���~�g0 4 � �y�S�|'`ё^\g��_�_�ST[�Q�S�^�m�(W8T4l�~ N�br^0 5 � �kT[�ReQ2 m l �S��4l 6 � (u�e�v�|'`ё^\g�vg0(Wh�S�Gd�^ N�6 0 0 - 9 0 0 r p m �1 8 - 2 5 !�v�s�XN/ca�5 m i n 0�mSO/f&T�n�Qv^ NOq_�T�[���~�g0 7 � �y�S�|'`ё^\g��_�_�ST[�Q�S�^�m�(W8T4l�~ N�br^0 8 � �kT[�ReQ1 5 0 �L �c�S�Q�m��QT�kT[-N�ReQ5 0 �L p�SՋBR��zsS�mTGW S0 9 � (Wh�S�Gd�^�4 0 0 - 6 0 0 r p m � N1 8 - 2 5 !�v�s�XN�c�S2 0 m i n 0��e ��vg � 1 0 � �_�_�ST[�Q�S�^�m�(W8T4l�~ N�br^0 1 1 � �kT[�ReQ2 m l �S��4l0 1 2 � (u�e�v�|'`ё^\g�vg0(Wh�S�Gd�^ N�6 0 0 - 9 0 0 r p m �1 8 - 2 5 !�v�s�XN/ca�5 m i n 0�mSO/f&T�n�Qv^ NOq_�T�[���~�g0 1 3 � �y�S�|'`ё^\g��_�_�ST[�Q�S�^�m�(W8T4l�~ N�br^0 1 4 � �kT[�ReQ3 0 0 �L R e l e a s e �Q�m0 1 5 � (Wh�S�Gd�^�4 0 0 - 5 0 0 r p m � N1 8 - 2 5 !�v�s�XN/ca�3 0 m i n 0��e ��vg � �]�QY}Y�v7h�T�^S_(WS_)Y1\ۏL��hKm0�Y�g NL��v��`�S\�c�Sg(u�|'`ё^\g�v}Y�(W2 - 8 !�v�s�XN�SX[>e NY0 9 0�[��ek�� 9 . 1 C O M T v��n�m�v�QY �la�C O M T v��n�m�^(WO(uMR�v�c4N�eM�n0 (WC O M T �Qr^�|-N�ReQ1 . 2 5 m l �S��4l�EQR�m�T0�Q�ReQ1 . 2 5 m l v�T��n�m�6qT�Q�ReQ1 . 2 5 m l v��n�m�T0 . 4 0 m l C O M T �m�RBR�NEQR�mT�n㉄vC O M T ՋBR* �C O M T v��n�m gT�vSO�y:N�k/e4 . 1 5 m l 0 N/e�SZP4 8 �N�N0�n�m�S(u�e�m�mThV�mT�FO���MQl�l�Nu�M�n}Y�vC O M T �n�m�S(W�[)nN3z�[X[>e1 \�e0 * �Y�g�S ��� N�[ϑ�vC O M T �n�m�RiRYO�vC O M T �n�m�^�zsS�QX[�N- 2 0 !�v�s�XN0C O M T �n�m�S(Wdk�s�XN3z�[X[>e1 - 2 *Ng0 9 . 2 7h�T0h�Q�T�T(��c�T�vv�RS �la �Y�g���hKm�� Nz� }�T�S2u�� Nz� }�b�N�^���`HQ�hKm�� Nz� }0�Y�gO(uꁨRnbc�Wc��mhV�R7h���\�S7h8T4Y�Q�v�kYO�mSO�ReQ0R�c�Sg�v�v�^�_T[�Q�&TRiRYO�v�c�S�m NY�S2u�� Nz� }�hKm(u0\�c�Sg>e0R g N�[aW�^�vMOn N0�[�� _�YMR�nx�[}Y�� Nz� }�T�S2u�� Nz� }�v�hKmT[v^h��}Y0 9 . 3 ?\�mN@�Fm-N�v�S2u�� Nz� } 1 (W�k N�_T[�Q�ReQ2 5 u l 4N�eM�6R�vC O M T v��n�m�{�{�/cg�NO�n�m�mTGW S0 2 \�c�S}Y�vh�Q�T0(��c�T�T7h�TR+R2 5 u l �ReQ0R�v�^�v�_T[�Q0(Wdkek��-N�b�N�S�N\�S7h8T4Y�v�c�meQ0RC O M T �n�m̑0�R7hT��n�m��r��Sb�|r��{�{�/cg�NO�n�m�mTGW S0 3 T�k N�_T[-N�ReQ5 0 u l �S2u�� Nz� }�b@�n�݄r� �0 4 �vg�(Wh�S�Gd�^ N�4 0 0 - 6 0 0 r p m �1 8 - 2 5 !�v�s�XNu[��1 2 0 m i n 0 8 . 4 �Qr^�|bSm)bR�v�QY zʑ bR zʑ�m �k�O Y�l .�X[ 3z�['` 2 0 m l m�m�m 1 8 0 m l �S��4l 1 �1 0 EQR�mT 2 - 8 ! 4 W 6 0 �L v�T�ir 6 m l m�m�Q�m��] zʑ}Y � 1 �1 0 1 4N�eM�n��N��O(u N!k��mT�e�MQl�l�Nu 1 8 - 2 5 ! 3 0 m i n 4 P N P P �^irGr 1 0 . 7 m l P N P P �^ir�Q�m 4N�eM�n��N��O(u N!k 1 8 - 2 5 ! 1 0 m i n 9 . 5 E L I S A �[��ek�� �y�S�|'`ё^\g�_�ST[�Q�S�^�m��kT[(u2 5 0 - 3 0 0 u l zʑ}Y�vm�m�mmg4 !k0 gT(W8T4l�~ N�br^�Nd��S�kYO�mSO0 (W�k N�_T[-N�ReQ1 0 0 u l 4N�eM�n}Y�vv�T�ir0 �vg�(Wh�S�Gd�^ N�4 0 0 - 6 0 0 r p m �1 8 - 2 5 !�v�s�XNu[��6 0 m i n 0 �y�S�|'`ё^\g�_�ST[�Q�S�^�m��kT[(u2 5 0 - 3 0 0 u l zʑ}Y�vm�m�mmg4 !k0 gT(W8T4l�~ N�br^ Nd��S�kYO�mSO0 �Y�g�S�N�v�O(u8 S��y�mhV�R�^ir�m�T�~bk�m0�R�^ir�m�T�~bk�m�v�e�������^S_�vT�O(uꁨRnbc�W�y�mhVv^�MQl�l�Nu0 (W�k N�_T[-N�ReQ2 0 0 u l �^ir�m0 N���vg�(Wh�S�Gd�^ N�4 0 0 - 6 0 0 r p m �1 8 - 2 5 !�v�s�XNu[��6 0 m i n 0 (W�k N�_T[�Q�ReQ5 0 u l P N P P �~bk�m�N�~bkv��S�^0{�{�/cg�NO�n�m�mTGW S0 �R�~bk�mT6 0 m i n �Q4 0 5 n m Y���SO D